1. 嚴(yán)格的四區(qū)分離

各區(qū)域必須在物理空間上完全隔開(kāi)，不能以室內(nèi)隔斷或開(kāi)放式概念設(shè)計(jì)。每一區(qū)都應(yīng)有獨(dú)立的緩沖間和專(zhuān)用物品。

• 試劑準(zhǔn)備區(qū)（Ⅰ區(qū)）：

• 功能：用于PCR主反應(yīng)混合液的配制、分裝和保存。此區(qū)應(yīng)是最“干凈”的，尚未接觸樣本。

• 位置：應(yīng)位于整個(gè)流程的起始端，與樣本制備區(qū)相鄰。

• 樣本制備區(qū)（Ⅱ區(qū)）：

• 功能：進(jìn)行臨床樣本的核素提取、貯存和加樣。此區(qū)是氣溶膠污染的最高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)。

• 位置：緊鄰試劑準(zhǔn)備區(qū)和基因擴(kuò)增區(qū)，是核心操作區(qū)。

• 基因擴(kuò)增區(qū)（Ⅲ區(qū)）：

• 功能：進(jìn)行DNA/RNA的擴(kuò)增。此區(qū)是擴(kuò)增產(chǎn)物濃度最高的區(qū)域。

• 位置：位于樣本制備區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)之間。

• 產(chǎn)物分析區(qū)（Ⅳ區(qū)）：

• 功能：對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)定和分析。此區(qū)是擴(kuò)增產(chǎn)物開(kāi)放的場(chǎng)所，污染風(fēng)險(xiǎn)同樣很高。

• 備注：對(duì)于定性檢測(cè)且使用密閉管檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室，此區(qū)可酌情與擴(kuò)增區(qū)合并。但新建或高標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室建議獨(dú)立設(shè)置。

2. 明確的人流、物流路徑

• 人流：人員進(jìn)入各區(qū)域前，必須經(jīng)過(guò)獨(dú)立的緩沖間，并在該區(qū)內(nèi)更換專(zhuān)用工作服和鞋套。嚴(yán)禁逆向流動(dòng)。

• 路徑：公共走廊 → 緩沖間（Ⅰ區(qū)）→ Ⅰ區(qū) → 緩沖間（Ⅱ區(qū)）→ Ⅱ區(qū) → ... 以此類(lèi)推。

• 物流：試劑和樣本必須通過(guò)傳遞窗傳遞。

• 傳遞窗要求：必須帶互鎖裝置（防止兩扇門(mén)同時(shí)打開(kāi)）和紫外燈，用于物品表面的消毒。

3. 絕對(duì)可靠的氣壓梯度

這是防止污染通過(guò)空氣擴(kuò)散的物理屏障，是設(shè)計(jì)的重中之重。

• 壓力方向：空氣壓力必須遵循 “正壓 → 負(fù)壓” 的梯度，即從潔凈區(qū)流向污染區(qū)。

• 試劑準(zhǔn)備區(qū)（Ⅰ區(qū)）壓力最高（最“干凈”）。

• 樣本制備區(qū)（Ⅱ區(qū)）壓力次之。

• 基因擴(kuò)增區(qū)（Ⅲ區(qū)）壓力再次之。

• 產(chǎn)物分析區(qū)（Ⅳ區(qū)）壓力最低（最“臟”）。

• 壓差值：相鄰區(qū)域之間的壓差應(yīng)維持在 ≥5 Pa 的水平，確保氣流單向流動(dòng)。

• 氣流組織：建議采用上送下回或上送下排的方式，保證氣流有序。