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淺談分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)要點(diǎn)_四川華銳-德宏實(shí)驗(yàn)室裝修公司

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德宏淺談分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)要點(diǎn)
發(fā)布時(shí)間:2020-01-05 01:02:45瀏覽次數(shù):6287

在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)工作之前,首先應(yīng)對(duì)工作中需要哪些最基本的設(shè)備條件有個(gè)全面的了解,以便因地制宜地利用現(xiàn)有房屋,或新建、改建實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室的大小取決于工作的目的和規(guī)模。以工廠化生產(chǎn)為目的,實(shí)驗(yàn)室規(guī)模太小,則會(huì)限制生產(chǎn),影響效率(efficiency)。
在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室時(shí),應(yīng)按組織培養(yǎng)程序(procedure)來沒計(jì),避免某些環(huán)節(jié)倒排,引起日后工作混亂。植物組織培養(yǎng)是在嚴(yán)格無(wú)菌的條件下進(jìn)行的。要做到無(wú)菌的條件,需要一定的設(shè)備、器材和用具,同時(shí)還需要人工控制溫度(temperature)、光照、濕度等培養(yǎng)條件。
實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則:保證無(wú)菌(意思:沒有活菌)操作,達(dá)到工作方便,防止污染。
實(shí)驗(yàn)(experiment)室組成:化學(xué)實(shí)驗(yàn)室、洗滌(washing)菌室、無(wú)菌操作室(接種室)、培養(yǎng)室、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室、其他小型儀器(appliance)設(shè)備。
1) 化學(xué)實(shí)驗(yàn)室(準(zhǔn)備室):完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、配制、培養(yǎng)基分裝等。
主要設(shè)備:藥品柜、防塵櫥(放置培養(yǎng)容器)、冰箱、天平、蒸餾(still)水器、酸度計(jì)及常用的培養(yǎng)基配制用玻璃儀器。
2) 洗滌(washing)、滅菌室:完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養(yǎng)基的滅菌等。
主要設(shè)備:水池、操作臺(tái)、高壓滅菌鍋、干燥滅菌器(如烘箱)等。
3) 無(wú)菌(fungus)(意思:沒有活菌)操作室(接種室):主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及一切需要進(jìn)行無(wú)菌操作的技術(shù)程序。
主要設(shè)備:紫外光源、超凈工作臺(tái)、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針)等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),為了獲得有關(guān)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等方面的新知識(shí)或解決具體問題而使用動(dòng)物 進(jìn)行的科學(xué)研究。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)必須由經(jīng)過培訓(xùn)的、具備研究學(xué)位或?qū)I(yè)技術(shù)能力的人員進(jìn)行或在其指導(dǎo)下進(jìn)行。
接種室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒。配置(deploy)拉動(dòng)門,以減少開關(guān)門時(shí)的空氣擾動(dòng)。接種室要求干爽安靜,清潔明亮。在適當(dāng)位置吊裝1~2盞紫外線(Ultraviolet rays)滅菌(fungus)燈,用以照射滅菌。最好安裝一小型空調(diào),使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對(duì)流。接種室應(yīng)設(shè)有緩沖問,面積1m2為宜。進(jìn)入無(wú)菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進(jìn)出時(shí)帶入接種室雜菌。緩沖間最好也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。
4) 培養(yǎng)室:培養(yǎng)室是將接種的材料進(jìn)行培養(yǎng)生長(zhǎng)的場(chǎng)所。P3實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)三級(jí)實(shí)驗(yàn)室,簡(jiǎn)稱P3實(shí)驗(yàn)室,P是Physical 的縮寫。整個(gè)實(shí)驗(yàn)室完全密封,室內(nèi)處于負(fù)壓狀態(tài),從而使實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的氣體不會(huì)泄漏到外面而造成污染。培養(yǎng)室的大小可根據(jù)需要培養(yǎng)架的大小、數(shù)目、及其他附屬設(shè)備而定。其設(shè)計(jì)以充分利用空間和節(jié)省能源為原則。
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室PCR
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能(maybe)性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí),要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
1.試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū):該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。 對(duì)與氣流壓力的控制(control),本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。
2.標(biāo)本制備區(qū):該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)cDNA的合成。 本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。
3. 擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū):該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為DNA或cDNA擴(kuò)增。此外,已制備的DNA模板和合成(解釋:由幾個(gè)部分合并成一個(gè)整體)的cDNA(來自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。在巢式PCR測(cè)定中,通常在第一輪擴(kuò)增后必須打開反應(yīng)管,因此巢式擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性,第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。 本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
4.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定。如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測(cè),此區(qū)域可不設(shè)。 本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源,因此對(duì)本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。
5.完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施:完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件,應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)網(wǎng)站內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器(appliance),如超凈工作臺(tái)、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器等。化學(xué)實(shí)驗(yàn)室人們利用它們來探索學(xué)習(xí)物質(zhì)及其變化的奧秘。進(jìn)入化學(xué)實(shí)驗(yàn)室之前一定要仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)室規(guī)則,嚴(yán)格按照規(guī)則操作。因?yàn)楹芏嗟幕瘜W(xué)藥品對(duì)人體的危害性非常大,對(duì)環(huán)境也有較大污染。
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